倒置熒光顯微鏡是免疫熒光細(xì)胞化學(xué)的基本工具。是由光源、濾板系統(tǒng)和光學(xué)系統(tǒng)等主要部件組成。利用一定波長的光激發(fā)標(biāo)本發(fā)射熒光,通過物鏡和目鏡系統(tǒng)放大以觀察標(biāo)本的熒光圖像。細(xì)胞中有些物質(zhì),如葉綠素等,受紫外線照射后可發(fā)熒光;另有一些物質(zhì)本身雖不能發(fā)熒光,但如果用熒光染料或熒光抗體染色后,經(jīng)紫外線照射亦可發(fā)熒光,倒置熒光顯微鏡就是對這類物質(zhì)進(jìn)行定性和定量研究的工具之一。
攝影對于記錄熒光圖像是非常必要的。由于熒光容易褪色和減弱,因此有必要對實時照相的結(jié)果進(jìn)行記錄。該方法與普通顯微攝影方法基本相同。只需使用高速光敏膜,如ASA200或以上或24。上面。由于紫外光對熒光的猝滅效應(yīng)很大,如熒光標(biāo)記物FITC等,在紫外光照射30s時,熒光亮度下降了50%,因此曝光速度太慢,無法捕捉到熒光圖像,一般有半自動或全自動顯微攝影系統(tǒng)。
下面要為大家介紹的是倒置熒光顯微鏡的使用注意事項:
1、嚴(yán)格按照操作說明書的要求制造的熒光顯微鏡,不改變該程序。
2、檢查應(yīng)在暗室進(jìn)行。進(jìn)入暗室后,接通電源,點燃超高壓汞燈5-15分鐘。當(dāng)光源發(fā)出強光并穩(wěn)定下來時,眼睛有效適應(yīng)暗室,然后開始觀察標(biāo)本。
3、為防止紫外線對眼睛造成損害,調(diào)節(jié)光源時戴防護(hù)眼鏡。
4、每次檢查時間為1~2h,超過90min,超高壓汞燈的發(fā)光強度逐漸降低,熒光降低;紫外線照射3~5分鐘后熒光降低。因此,不超過2~3h。
希望上述內(nèi)容能夠幫助大家更好的了解本顯微鏡。